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生化試劑盒

總膽固醇(TC)含量試劑盒-微量法
恒遠(yuǎn)生物生化試劑盒應(yīng)用領(lǐng)域廣泛,涉及酶類、氧化應(yīng)激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質(zhì)代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富,涉及多種體液、組織、細(xì)胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標(biāo)儀,分光光度計和熒光酶標(biāo)儀。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高效專業(yè)的生化代測服務(wù)和實驗技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間、極具競爭力的價格,所有這些保證了我們向您提供的最專業(yè)最優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

中文名稱

總膽固醇(TC)含量試劑盒-微量法

規(guī)格 96樣
貨號

L-739-SH

價格 ¥390
樣本類型 血清,血漿,組織勻漿,細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等
檢測范圍 詳見說明書
檢測方法

微量法

貨期 3-5天
說明書 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取
文獻(xiàn) 咨詢我司業(yè)務(wù)員獲取

    意:正式測定之前選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。

測定意義:

TC包括游離膽固醇和膽固醇酯。TC是指組織中所有脂蛋白所含膽固醇之總和。

 

測定原理:

利用酯酶催化膽固醇酯水解生成游離膽固醇(FC)和游離脂肪酸(FFA),從而把膽固醇酯轉(zhuǎn)化為FC;進(jìn)一步利用膽固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-膽甾烯酮和H2O2;最后利用過氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成紅色醌類化合物;在500nm有特征吸收峰,其顏色深淺與TC含量成正比。

 

自備儀器和用品:

水浴鍋、可調(diào)式移液槍、酶標(biāo)儀、96孔板。

 

試劑組成和配置:

試劑一:異丙醇100mL(自備);

試劑二:液體20mL×1瓶,4℃保存;

試劑三粉劑×1瓶,4℃保存;

試劑四:液體40μL×1瓶,4℃保存;

TC標(biāo)準(zhǔn)品:液體1mL×1支,0.5μmol/mL4℃保存。

 

TC的提取:

1、組織中TC的提?。喊凑战M織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)15~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿,8000g 4℃離心10min,取上清,即TC待測液。

2、細(xì)胞、細(xì)菌中TC的提?。?/span>先收集400-500萬細(xì)胞或細(xì)菌到離心管內(nèi),棄上清,加1mL試劑一,超聲波破碎1min(強度20%,超聲2s,停1s,即TC待測液。

3、血清(漿)等樣品:直接測定。

 

測定操作:

1. /酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長到500 nm。

2. TC工作液的配制:臨用前,吸取約0.8mL試劑二分別加入試劑三和試劑四瓶中,充分溶解后再全部轉(zhuǎn)移回試劑二瓶中,充分混勻,TC工作液置于37℃水浴10min用不完的工作液4℃保存一周。

3. 標(biāo)準(zhǔn)管:依次在96孔板中加入20μL FC標(biāo)準(zhǔn)液和180μL TC工作液,混勻,37℃靜置3h后于500nm測定A標(biāo)準(zhǔn)管。

4. 測定管:依次在96孔板中加入20μL FC待測液和180μLTC工作液,混勻,37℃靜置3h500nm測定A測定管。

5. 空白管:依次在96孔板中加入20μL 試劑一180μLTC工作液,混勻,37℃靜置3h500nm測定A測定管。

注意:標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只需測定一次。

 

計算公式:

1. 血清(漿)TC含量計算:

TCμ mol /dL=C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)×100

 =50×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)

C標(biāo)準(zhǔn)液:0.5μmol/mL;100 mL1dL=100 mL。

2. 組織TC含量計算:

(1)按樣本蛋白濃度計算

TCμ mol / mg prot= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr

    = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr

(2)按樣本質(zhì)量計算

TCμ mol / g 鮮重= C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

    = 0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W

C標(biāo)準(zhǔn)液:0.5μmol/mL;樣本蛋白濃度,mg/mL;W樣本質(zhì)量,g/mL

3. 細(xì)胞、細(xì)菌中TC含量計算:

TCμ mol /104 cell=C標(biāo)準(zhǔn)液×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /L

    =0.5×(A測定管-A空白管)÷(A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷細(xì)菌或細(xì)胞(104 cell /L

C標(biāo)準(zhǔn)液:0.5μmol/mL

最低檢出限為1nmol/mL。

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